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Autor: Pacheco Escudero, Nancy Thais ; Mosquera, Ortelio Everto ; Mosquera, Ortelio Everto
Título: DETECCION DE Brucella sp. POR PCR EN SANGRE DE BOVINOS
Polimerasa Chain Reaction (PCR) detection of Brucella sp. in bovine blood.
ISSN: 1690-8414
Fecha: 2015
Páginas/Colación: pp. 26-34
En:/ Gaceta de Ciencias Veterinarias Vol 20 Nro.2 Diciembre 2015
Información de existenciaInformación de existencia
Categoría Temática: Palabras: VET01 VET01
Palabras Claves del Autor: Palabras: BOVINO BOVINO, Palabras: BRUCELLA ABORTUS BRUCELLA ABORTUS, Palabras: DIAGNÓSTICO DIAGNÓSTICO, Palabras: PCR PCR, Palabras: SANGRE SANGRE
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RESUMEN
El objetivo de este estudio se enmarca en la estandarización de la PCR de secuencias genómicas parciales específicas del género Brucella: genes 16S RNAr y Omp2, en sangre de bovinos seropositivos a las pruebas oficiales, como una técnica alternativa para la confirmación de los resultados obtenidos por las pruebas serológicas. Para este estudio fue seleccionado un rebaño de 31 bovinos identificado como seropositivo a brucelosis, de acuerdo con las pruebas serológicas oficiales. Fue utilizado el programa estadístico Epidat 3.1 para calcular la sensibilidad y especificidad de las pruebas serológicas incluidas, con respecto a la prueba Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), siendo realizadas las pruebas, Rosa de Bengala (RB), Seroaglutinación Lenta en Tubo (SLT) y 2Mercaptoetanol (2ME), los resultados logrados en la sensibilidad fue de 100% para SLT y la especificidad de 88% la obtuvo la prueba RB, mientras la concordancia de acuerdo al índice Kappa, fue discreta, para la prueba RB en relación a PCR. En cuanto a la amplificación por PCR de los genes incluidos en el estudio fue exitosa en el 16 % (5/31) de las muestras analizadas, considerado los animales verdaderos positivos a la enfermedad. Se concluye que la PCR es una herramienta de diagnóstico muy importante para avanzar en el control de la brucelosis bovina en el país, evitando la eliminación de animales valiosos o dejando animales falsos negativos que continúen diseminando la enfermedad en el rebaño bovino nacional.

Palabras Claves: Bovino, Diagnóstico, PCR, Brucella abortus, Sangre

Abstract:

The main objective of this research was to standardize specific and partial genomic sequences of Brucella genus: genes 16S rRNA, and omp from blood of seropositive cattle, in order to confirm results reached by serologic tests. A herd of 31 bovines was selected and identified as seropositive to brucelosis by official serological tests. The program Epidat 3.1 was chosen to determine sensitivity and specificity of those serological tests, against the Polymarase Chain Reaction (PCR). Bengala Rose (BR), slow seroagglutination in tube (SST), and 2 mercaptoethanol (2ME) tests were the official serological assays used. 2ME showed a sensitivity of 100%, and a specificity of 88% was found for the BR test, whereas the correlation (by Kappa Index) was discrete for the test RB when related to the PCR test. With regard to PCR amplification of selected genes was successful in a 16% (5 out of 31) of blood samples tested collected from true positives to brucelosis. In conclusión, PCR is a very important diagnostic tool to advance in the bovine brucelosis control in Venezuela, since it avoids the culling of valuable animals, and it discovers false negatives, which would stay in farms as a source of infection for other herds.

Key words: bovine, diagnosis, PCR, Brucella abortus, blood

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
[1] Lord V. Diagnóstico de Brucelosis. X Curso sobre Diagnóstico Serológico de Brucelosis Bovina. Ministerio de Agricultura y Tierras (MAT). Servicio Autónomo de Sanidad Agropecuaria (SASA). 2002;79-83, Lara, Venezuela.
[2] Informe Técnico. Diagnostico situacional de Brucelosis bovina Ministerio de Agricultura y Tierras (MAT). Servicio Autónomo de Sanidad Agropecuaria (SASA). 1999;1-10, Lara, Venezuela.
[3] Vargas F. Situación epidemiológica de la brucelosis en Venezuela. Gaceta Cs Vet 2003; 8(2):69-78.
[4] Castro H, González S, Prat M. Brucelosis: una revisión práctica. Acta Bioquím Clín Latinoam 2005; 39 (2):203-216.
[5] Contreras J. Brucelosis en: Contreras, J. (Editor). Enfermedades de los bovinos. Diagnóstico Tratamiento Control 2000; 2 ed.p 859.
[6] Acha P, Szyfres B. Zoonosis y enfermedades transmisibles comunes al hombre y a los animales. Tercera Edición. Vol. I. Bacteriosis y micosis. Publicación Científica y Técnica No. 580. Organización Panamericana de la Salud (OPS). Organización Mundial de la Salud (OMS) 2001; 28-56.
[7] Corbel MJ, Stuart FA, Brewer RA. Observations of serological cross - reactions between smooth Brucella species and organisms of other genera. Dev Biol Stand 1984; 56:341-348.
[8] Freer E, Castro R. Brucella: una bacteria virulenta carente de los factores de virulencia clásicos. Rev Costarric Cs Med 2001; 22 (1-2):1-9.
[9] González J. Programa de brucelosis: Situación epidemiológica y estrategias para la prevención y el control/erradicación en Venezuela. Reunión de expertos en brucelosis OPS/OMS 1999, Santiago de Chile.
[10] Da Costa M, Guillou JP, Garin -Bastuji B, Thiébaud M, Dubray G. Specificity of six gene sequences for the detection of the genus Brucella by DNA amplification. J Appl Bacteriol 1996; 81(3):267 -275.
[11] Aréstegui MB, Gualtieri CS, Domínguez J, Scharovsky GS. El género Brucella y su interacción con el sistema mononuclear fagocítico. Vet Mex 2001; 32(2):131-139.
[12] Romero C, Gamazo C, Pardo M, Lopez-Goñi I. Specific detection of brucella DNA by PCR. J Clin Microbiol 1995; 33(3):615-617.
[13] Matar GM, Khneisser IA, Abdelnoor AM. Rapid laboratory confirmation of human brucellosis by PCR analysis of a target sequence on the 31 -kilodalton Brucella antigen DNA.J Clin Microbiol. 1996; Feb; 34(2):477-478.
[14] Al-Attas RA, Al-Khalifa M, Al-Qurashi AR, Badawy M, Al-Gualy N. Evaluation of PCR, culture and serology for the diagnosis of acute human brucellosis. Ann Saudi Med 2000; May-July; 20(3-4):224-228.
[15] Sánchez M, Cardona N. Evaluación de la prueba PCR para la detección de Brucella abortus . Rev CES Med Vet y Zoot 2013; 8 (2):61-72
[16] Álvarez M, Saldaña C, Ballesteros M, Morales A. Comparación de las pruebas: Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR), serología y hemocultivo con respecto a sensibilidad y especificidad, para la detección de Brucella sp en muestras humanas. Gac Med Mex 2015; 151:620 -627.
[17] Rosales D, Lugo A, Andueza F, López A. Pesquisa serológica y molecular de Brucella sp en un rebaño bufalino lechero en la cuenca del sur del Lago de Maracaibo. Rev Salud Ani 2015; 37(2):112-117. Brucella sp en un rebaño bufalino lechero en la cuenca del sur del Lago de Maracaibo. Rev Salud Ani 2015; 37(2):112-117.
[18] Jaramillo C, Martínez J. Consideraciones en el uso de pruebas diagnósticas. Epidemiología Veterinaria. 2 Ed. Manual Moderno. México D.F 2010.
[19] Jalava KR, Jalava J. Método óptimo de aislamiento de ADN para la detección de bacterias en muestras por PCR. J Clin Bacteriol 2002; 40(11):4211-4217.


 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 

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